115年:(醫檢)免疫病毒(1)
有關細胞培養之敘述，下列何者錯誤？
A需要定期檢測是否有黴漿菌污染
B需要定期測試對病毒的感受性
C解凍細胞時放在冰上讓其慢慢溶解
D冷凍細胞時需要外加抗凍劑
詳細解析
本題觀念：
本題主要考查 細胞培養 (Cell Culture) 的品質管控 (Quality Control) 與 冷凍保存/解凍 (Cryopreservation/Thawing) 的標準操作程序。特別是臨床病毒實驗室中，細胞株的維護對於病毒分離的敏感度至關重要。
選項分析
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A. 需要定期檢測是否有黴漿菌污染 (正確)
- 理由：黴漿菌 (Mycoplasma) 是細胞培養中最常見且棘手的汙染源之一（約 15-35% 的實驗室細胞系受汙染）。它無法透過一般光學顯微鏡觀察，且通常不使培養基變混濁。黴漿菌會改變細胞代謝、基因表現及病毒感染效率，嚴重影響實驗結果或診斷準確性。因此，實驗室必須定期使用 PCR、螢光染色 (如 Hoechst stain) 或培養法進行檢測。
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B. 需要定期測試對病毒的感受性 (正確)
- 理由：此選項針對的是「醫事檢驗師」所在的臨床病毒實驗室情境。用於分離病毒的細胞株（如 MDCK, Vero, Hep-2 等），隨著傳代次數增加，其細胞表面受體或代謝狀態可能改變，導致對特定病毒的敏感度（Susceptibility）下降。因此，為了確保病毒分離與鑑定的準確性，必須定期使用標準病毒株進行敏感性測試 (Quality control of cell sensitivity)。
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C. 解凍細胞時放在冰上讓其慢慢溶解 (錯誤)
- 理由：細胞解凍 (Thawing) 的黃金原則是 「快速解凍」。
- 機制：冷凍保存液中含有抗凍劑（如 DMSO），在液態或高濃度下對細胞具有毒性。且慢速解凍會導致冰晶在細胞內發生「再結晶 (Recrystallization)」現象，物理性刺破細胞膜導致細胞死亡。
- 正確操作：應將凍管從液態氮取出後，立即放入 37°C 水浴槽中輕輕搖晃，使其在 1-2 分鐘內迅速融化，並儘快加入培養基稀釋或離心去除 DMSO，以減少細胞毒害。放在冰上慢慢溶解會導致細胞長時間暴露於高濃度 DMSO 及冰晶傷害中，大幅降低存活率。
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D. 冷凍細胞時需要外加抗凍劑 (正確)
- 理由：細胞冷凍 (Freezing) 的原則是「慢速冷凍」。為了防止水分子在低溫下形成冰晶刺破細胞，必須加入 抗凍劑 (Cryoprotectant)，最常用的是 DMSO (二甲基亞碸) 或 Glycerol (甘油)。它們能置換細胞內的水分，降低冰點，保護細胞結構完整。
答案解析
選項 C 敘述錯誤。細胞解凍必須在 37°C 水浴中快速進行，而非在冰上緩慢溶解，這是細胞培養技術中最基礎且關鍵的操作原則。
核心知識點
醫事檢驗師國考準備重點：
- 細胞冷凍原則：慢凍 (Slow freezing)，需降溫速率約 -1°C/min，需添加抗凍劑 (DMSO, Glycerol) 防止冰晶形成。
- 細胞解凍原則：快解 (Rapid thawing)，37°C 水浴，避免再結晶與 DMSO 毒性。
- 黴漿菌汙染：最常見、肉眼不可見、需定期檢測 (PCR, Hoechst stain, 培養法)。
- 臨床病毒培養 QC：細胞株需定期監測「型態 (Morphology)」、「黴漿菌汙染」及「病毒敏感性 (Viral susceptibility)」。