依中華藥典， Neomycin Sulfate and Prednisolone Acetate Ophthalmic Suspension 應採用何種無菌試驗法？

本題觀念：

本題考查的是中華藥典（及 USP <71>）無菌試驗法（Sterility Tests） 的選擇原則，特別是針對含有抑菌成分（如抗生素/防腐劑） 之藥品。

選項分析

• (A) 微孔濾膜過濾法 (Membrane Filtration)：正確。

  • 原理：將檢品通過孔徑約 0.45 μm 的濾膜，微生物會被截留在濾膜上，而藥液（含抑菌成分）則濾過移除。隨後可用無菌沖洗液沖洗濾膜，以去除殘留的抗生素或防腐劑，最後將濾膜轉移至培養基中培養。
  • 適用性：此法是無菌試驗的首選方法（Preferred Method）。特別適用於：
    1. 含抑菌劑或抗生素的液體製劑（可透過沖洗移除抑菌活性，避免偽陰性）。
    2. 可過濾的水溶性液體。
    3. 可溶解之固體。
  • 針對本題藥物：Neomycin Sulfate 是一種氨基糖苷類抗生素（Aminoglycoside antibiotic），具有強殺菌力。若採用直接接種法，藥品中的抗生素進入培養基後會抑制微生物生長，導致偽陰性（False Negative）。因此，必須使用微孔濾膜過濾法將抗生素濾除並沖洗，才能確保試驗準確性。美國藥典（USP）針對 Neomycin Sulfate and Prednisolone Acetate Ophthalmic Suspension 的個論（Monograph）中亦明確指定採用 Membrane Filtration。

• (B) 直接接種法 (Direct Inoculation)：錯誤。

  • 原理：直接將檢品加入培養基中。
  • 適用性：僅在不可使用微孔濾膜過濾法時才使用。例如：
    1. 無法過濾的混懸液或油劑（且無法溶解者）。
    2. 手術縫合線。
    3. 醫療器材。
  • 雖然本題藥品為懸液劑（Suspension），但眼用懸液通常粒徑極小，或者可透過稀釋/溶解處理進行過濾。且因含有抗生素，直接接種法會有抑菌干擾問題，故不適用。

• (C) 細胞表面抗原檢測法：錯誤。此為免疫學檢測方法，用於鑑定細胞特性，與無菌試驗無關。

• (D) 血瓶微生物培養法：錯誤。此為臨床上檢測病人是否菌血症（Bacteremia）的診斷方法，非藥典規範的藥品品質管制（QC）無菌試驗方法。

答案解析

根據中華藥典及 USP 規範，含抗生素之製劑進行無菌試驗時，為避免藥物本身的抑菌作用干擾細菌生長（造成偽陰性），應優先採用微孔濾膜過濾法 (A)。透過過濾與沖洗步驟，可移除 Neomycin Sulfate，使截留在濾膜上的汙染微生物得以在培養基中生長並被檢出。

核心知識點

1. 無菌試驗法優先順序：微孔濾膜過濾法 > 直接接種法。
2. 微孔濾膜過濾法適用情境：
   • 含抗生素或防腐劑之製品（最重要理由：移除抑菌性）。
   • 大體積注射劑（LVP）。
   • 可過濾之水溶液、油性液體（需溶解）、可溶性粉末。
3. 直接接種法適用情境：
   • 具破壞性或無法過濾之檢品（如手術線、紗布、部分醫療器材）。
   • 極難過濾且無法藉由溶解改善的混懸液。
4. 結果判讀：培養 14 天後，觀察培養基是否混濁。

參考資料

1. USP Monograph: Neomycin Sulfate and Prednisolone Acetate Ophthalmic Suspension. USP-NF. (明確記載：STERILITY TESTS <71> — It meets the requirements when tested as directed for Membrane Filtration).
2. 中華藥典第九版，通則 <6001> 無菌試驗法。