111年:醫學一(2)
下列何者為桑格定序法（ Sanger sequencing method ）的關鍵分子？
A1', 2'-雙脫氧核苷酸（ 1', 2'-dideoxyribonucleotides ）
B2', 3'-雙脫氧核苷酸（ 2', 3'-dideoxyribonucleotides ）
C2', 4'-雙脫氧核苷酸（ 2', 4'-dideoxyribonucleotides ）
D2', 5'-雙脫氧核苷酸（ 2', 5'-dideoxyribonucleotides ）
詳細解析
本題觀念：
本題考查的是 桑格定序法（Sanger sequencing method） 的核心生化原理，特別是 DNA 合成機制 與 核苷酸結構。桑格定序法又稱為「雙脫氧鏈終止法」（Dideoxy chain-termination method），其關鍵在於利用特殊的核苷酸來終止 DNA 聚合酶的合成反應。
選項分析
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(A) 1', 2'-雙脫氧核苷酸（1', 2'-dideoxyribonucleotides）：錯誤。 在核苷酸的五碳醣結構中，1' 碳原子是連接含氮鹼基（Nitrogenous base, 如 A, T, C, G）的位置。此處形成的是糖苷鍵（Glycosidic bond），並非羥基（-OH）所在位置，因此不存在 "1'-脫氧" 這種用於終止 DNA 鏈的機制。
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(B) 2', 3'-雙脫氧核苷酸（2', 3'-dideoxyribonucleotides）：正確。
- 正常 DNA 合成：使用去氧核苷酸（dNTP）。其五碳醣的 2' 位置是氫原子（-H，即去氧），而 3' 位置帶有羥基（3'-OH）。DNA 聚合酶必須利用這個 3'-OH 與下一個核苷酸的 5'-磷酸基團形成磷酸二酯鍵，才能延長 DNA 鏈
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