113年:營養生理生化(1)

Footprinting或DNase protection的分析方法常被應用於判斷下列何種狀況?

A突變所造成受損DNA的區域
B染色體上特定基因的位置
C單股DNA分子上內生性雙股區域的位置
D特定蛋白質(例如repressor、polymerase等)與DNA的結合狀況

詳細解析

本題觀念:

本題考查的是分子生物學中用於分析 DNA-蛋白質交互作用 (DNA-protein interaction) 的核心技術——DNA足跡法 (DNA footprinting),又稱為 DNase保護分析法 (DNase protection assay)

此技術的基本原理是:當一個特定的蛋白質(如轉錄因子、聚合酶、Repressor等)結合在DNA的特定序列上時,該蛋白質會保護結合部位的DNA,使其免受酵素(如 DNase I)的切割。在凝膠電泳分析中,未被切割的區域會形成一段空白,看起來像是一個「腳印 (footprint)」,藉此可精確定位蛋白質在DNA上的結合位置。

選項分析

  • A. 突變所造成受損DNA的區域錯誤

    • 偵測突變或DNA受損通常使用定序 (Sequencing)、Ames test (突變性測試)、Comet assay (彗星分析法,測DNA斷裂) 或錯配切割分析 (Mismatch cleavage) 等技術。
    • 雖然突變可能會影響蛋白質的結合,導致足跡消失或改變,但足跡法本身的設計目的是為了看「蛋白質結合在哪裡」,而非直接檢測受損區域。
  • B. 染色體上特定基因的位置錯誤

    • 定位染色體上特定基因

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