105年:藥學二(第2次)
逆相層析法的梯度沖提中,層析管柱相同下,下列何者最能改善分離結果?
A流速不變,沖提時間縮小為 0.5 倍
B流速不變,沖提時間增長為 1.5 倍
C流速增加至 1.5 倍,沖提時間縮小為 0.5 倍
D流速減少至 0.5 倍,沖提時間縮小為 0.5 倍
詳細解析
本題觀念:
本題考逆相層析法(reversed-phase LC)梯度沖提(gradient elution)的優化原理。核心概念是:在管柱不變的條件下,如何調整沖提參數才能最有效改善分離結果(resolution)?關鍵在於理解梯度體積(gradient volume)、**流速(flow rate, F)與梯度時間(gradient time, )**之間的關係,以及它們如何影響有效梯度保留因子()。
梯度沖提的核心方程式
在梯度 LC 中,有效梯度保留因子 的決定式為:
其中:
- :梯度時間(min)
- :流速(mL/min)
- :梯度範圍(有機相變化幅度,固定)
- :管柱死體積(固定,題目明確「管柱相同」)
- :分析物相關常數(固定)
增大 → 分析物保留時間增加 → 分離時間拉長 → 解析度(resolution)通常改善。
關鍵:梯度體積 = 。若梯度體積維持不變, 不變,分離結果相同。若梯度體積增大, 增大,分離改善(但分析時間延長)。
...(解析預覽)...
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