106年:(醫檢)檢驗(2)
最常用於檢測表觀基因調控( Epigenetic regulation )狀態的方法為何?
ADNA sequencing
BMethylation PCR
CSouthern hybridization
DDNA footprinting
詳細解析
本題觀念:
表觀基因調控(epigenetic regulation)是指不改變 DNA 序列本身,但透過化學修飾(如 DNA 甲基化、組蛋白修飾)或非編碼 RNA 來調控基因表現的機制。在臨床和研究實驗室中,檢測表觀基因調控狀態最重要、最廣泛使用的方法,主要針對**DNA 甲基化(DNA methylation)**的檢測,尤其是 CpG 位點的甲基化狀態。本題考查最常用的表觀遺傳檢測方法。
選項分析
(A) DNA sequencing 此選項部分正確但不夠精確。傳統 DNA 定序(如 Sanger sequencing)無法直接區分甲基化與非甲基化的胞嘧啶(cytosine),必須配合亞硫酸氫鹽(bisulfite)轉換處理後才能用於甲基化分析,稱為 bisulfite sequencing。因此「DNA sequencing」本身並非表觀基因調控的特定檢測方法,選項過於籠統。
(B) Methylation PCR 此選項正確。甲基化特異性 PCR(methylation-specific PCR, MSP)是目前最常用於檢測 DNA 甲基化(表觀基因調控最主要機制)的方法。其原理:
- 先以亞硫酸氫鹽(bisulfite)處理 DNA:非甲基化胞嘧啶(C)→ 尿嘧啶(U),甲基化胞嘧啶(5-methyl C)
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