GN （Gram-negative ）broth 培養多少小時後，必須次培養？

本題觀念：

GN（Gram-Negative）broth 又稱 GN 肉湯或 Hajna GN broth，是用於從糞便或臨床檢體中選擇性增菌革蘭氏陰性腸道病原菌（尤其是 Salmonella 和 Shigella）的液體培養基。本題考查 GN broth 的關鍵操作時間點：增菌培養後必須在何時進行次培養（subculture）至固體選擇性培養基，以獲得最佳的病原菌分離效果。

選項分析

(A) 4～6 小時 正確答案。 GN broth 的設計原理使其必須在 4～6 小時（部分文獻記載為 6～8 小時，但核心原則為「早期次培養」）內進行次培養。Hajna 建議在增菌培養 1～6 小時後即應次培養至固體培養基。此時間限制是 GN broth 的最重要操作注意事項。

(B) 16～20 小時 錯誤。延遲至 16～20 小時才次培養，Shigella 幾乎已被過度生長的大腸菌群（coliforms）所覆蓋，失去選擇性增菌的意義。

(C) 24～30 小時 錯誤。此時間點更長，已遠超最佳次培養時機，Shigella 特別容易被其他細菌過度生長（overgrowth）而消失。

(D) 36～48 小時 錯誤。此時間點完全不符合 GN broth 的使用規範，培養物幾乎已完全被大腸菌群佔領，無法有效回收 *Salm

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