106年:(醫檢)微生(2)
以培養液大量稀釋法( broth macrodilution test )測定 MIC 時,下列敘述何者錯誤?
A接種原調好後,應在 30 分鐘內接種
B最後接種濃度應達 1.5 × 10⁹ CFU/ml
C培養 18 ~24 小時後觀察
D以能抑制細菌生長(沒有混濁)的最低抗生素濃度為 MIC
詳細解析
本題觀念:
本題考培養液大量稀釋法(broth macrodilution test)測定最小抑菌濃度(minimum inhibitory concentration, MIC)的標準操作,依據 CLSI M07 文件。其中最關鍵的是**接種菌量(inoculum concentration)**的正確數值。
選項分析
(A) 接種原調好後,應在 30 分鐘內接種 此選項正確。CLSI M07 規定,調好的接種液(inoculum)調整至 0.5 McFarland 濁度後,應在 15 分鐘內(部分說法為 30 分鐘內)稀釋並接種,以避免細菌繼續增殖導致接種量偏高。此選項描述在可接受範圍內。
(B) 最後接種濃度應達 1.5 × 10⁹ CFU/ml 此選項錯誤(本題為反向題,此即答案)。依據 CLSI M07 標準,broth macrodilution(及 microdilution)MIC 測試的最終接種濃度應為 CFU/mL(可接受範圍: 至 CFU/mL)。
操作步驟:
- 調整菌懸浮液至 0.5 McFarland 濁度(≈ CFU/mL)
- 再稀釋約 150 倍至 $\
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