106年:(醫檢)生化(2)

下列有關 fluorometry 的敘述,何者錯誤?

A可以用來檢測藥物濃度
B激發光波長比放射光波長短
C光源和偵測器是在同一直線上
D流式細胞計數儀是應用此技術的儀器

詳細解析

本題觀念:

螢光測定法(fluorometry)的基本原理與儀器設計,包括光源、激發光 vs. 放射光波長關係,以及偵測器擺放位置。本題為反向題,問何者「錯誤」。

選項分析

(A) 可以用來檢測藥物濃度 ✅ 正確陳述 螢光測定法靈敏度高,常用於檢測極低濃度物質,包括藥物(如抗生素、免疫抑制劑)、維生素及代謝物。這是正確敘述。

(B) 激發光波長比放射光波長短 ✅ 正確陳述 這是 Stokes shift 現象:分子吸收較短波長(較高能量)的激發光後,因部分能量以振動熱能散失,再以較長波長(較低能量)的螢光發射出來。因此激發光(excitation)波長 < 放射光(emission)波長,此為正確陳述。

(C) 光源和偵測器是在同一直線上 ❌ 錯誤陳述(= 本題答案) 這是關鍵錯誤點。螢光測定法的偵測器擺放在與入射光成 90°(直角) 的位置,而非同一直線上(180°)。若偵測器與光源同軸,則會直接偵測到透射激發光,嚴重干擾螢光訊號(訊雜比極差)。採用 90° 設計可有效排除入射光的干擾,大幅提升靈敏度。分光光度法(spectrophotometry)才是光源和偵測器在同一直線上(透射光)。

(D) 流式細胞計數儀是應用此技術的儀器 ✅ 正確陳述 流式細胞儀(flow cytometer)正是螢光測定法的重要應用。細胞

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