106年:(醫檢)免疫病毒(2)
下列何種方法無法加強 IgG 的凝集反應?
A離心(centrifugation )
B在反應液中加入蛋白 酶去除 sialic acid
C將反應液酸化,降低 pH 值
D在反應液中加入膠體( colloids )
詳細解析
本題觀念:
IgG 是不完全抗體(incomplete antibody),因其體積較大(分子量約 150 kDa),兩個 Fab 臂之間的距離(約 14 nm)無法同時橋接兩個相鄰紅血球(間距約 25 nm,因紅血球表面 sialic acid 帶負電荷相互排斥所致)。因此 IgG 在生理鹽水中不能直接凝集紅血球,需借助各種方法縮短細胞間距或增強抗體接觸,才能引發可見的凝集反應。本題考的是哪種方法無效。
選項分析
(A) 離心(centrifugation) 離心可以物理性地拉近紅血球與紅血球之間的距離,使已結合在紅血球表面的 IgG 有機會橋接相鄰細胞,誘發凝集反應。可以加強 IgG 凝集,不是本題答案。
(B) 在反應液中加入蛋白酶去除 sialic acid 蛋白酶(如 papain、ficin、bromelin、trypsin)可切割紅血球表面含有 sialic acid 的唾液酸醣蛋白(如 glycophorin A),降低紅血球表面的負電荷(zeta potential),使細胞間排斥力減小、彼此更靠近,從而加強 IgG 的凝集反應。可以加強 IgG 凝集,不是本題答案。
(C) 將反應液酸化,降低 pH 值 IgG 的抗體活性和凝集能力在中性至微鹼性(pH 6.5–8.0)環境下最佳。降低 pH
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