觀察未染色活體細胞內部之胞器結構，下列何種顯微鏡最適合？

本題觀念：

觀察未染色活體細胞（unstained living cells）內部胞器（organelles）結構，需要一種能將細胞內部折射率（refractive index）差異轉換為明暗對比的顯微技術，而不需要殺死或染色細胞。相位差顯微鏡（phase contrast microscope）正是為此而生。

選項分析

(A) 明視野（bright field） 明視野顯微鏡依賴樣品對光線的吸收或散射產生影像對比。未染色的活體細胞對光線的吸收極小，細胞內各胞器與周圍介質的對比度極低，幾乎看不到細胞內部結構。必須使用染色（staining）才能清楚觀察——但染色過程會殺死細胞，無法用於活體觀察。

(B) 相位差（phase contrast） ✅ 正確答案 相位差顯微鏡利用光線穿過不同折射率介質時產生的相位偏移（phase shift），透過特殊光學設計（環狀光圈 annular diaphragm + 相位板 phase plate）將相位差轉換為振幅差，進而形成明暗對比。活體細胞的核（nucleus）、核仁（nucleolus）、粒線體（mitochondria）、液泡（vacuole）等胞器，因折射率不同而呈現清晰的暗色影像。完全不需染色，可維持細胞的活體狀態。

(C) 偏光（polarizing） 偏光顯微鏡用於觀察具有雙折射

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