106年:(醫檢)檢驗(1)
下列何種方法是利用引子結合位來區分單一點突變，使擴增出來的片段長度不同而辨別正常型或是突變型？
A增幅限制 酶切位點（Amplified created restriction site, ACRS ）
B增幅阻礙突變系統（ Amplified refractory mutation system, ARMS ）
C應用核酸序列的放大反應（ Nucleic acid sequence-based amplification, NASBA ）
D單股結構多型性（ Single-strand conformation polymorphism, SSCP ）
詳細解析
本題觀念：
本題考察各種分子生物學突變偵測方法的原理，重點在區分「利用引子結合位（primer binding site）的特異性」來偵測點突變，且擴增片段長度因基因型不同而有所差異的技術。
選項分析
(A) 增幅限制酶切位點（Amplified created restriction site, ACRS） ACRS 的原理是利用設計的引子引入人工限制酶切位點（restriction site），再以限制酶（restriction enzyme）切割擴增產物，以電泳觀察片段大小來區分突變型與正常型。此法依賴限制酶切割而非引子結合的特異性，且是先擴增後再切割。
(B) 增幅阻礙突變系統（Amplification refractory mutation system, ARMS）→ 正確答案 ARMS（又稱 allele-specific PCR）的核心原理是：設計引子的 3' 末端與目標突變位點完全互補或不互補，因 Taq DNA polymerase 缺乏 3'→5' 校正活性，若引子 3' 末端有錯誤配對，則無法有效延伸。因此正常型和突變型各自只在特定引子組合下才能成功擴增，且由於引子設計位置不同，擴增片段的長度也不同，可藉由電泳條帶位置辨別基因型（同型合子正常型、同型合子突變型、異型合子）。
**(C) 應用核酸序列的
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