106年:(醫檢)檢驗(1)
下列何種分子檢驗技術不需使用探針?
A等位基因特異性寡 苷核酸(Allele-specific oligonucleotide, ASO )
B原位螢光雜交( Fluorescence in situ hybridization, FISH )
C即時聚合 酶連鎖反應( Real-time PCR )TaqMan 系統
D單股結構多型性( Single-strand conformation polymorphism, SSCP )
詳細解析
本題觀念:
分子診斷技術依偵測原理可分為「需要探針(probe)」與「不需要探針」兩大類。探針是一段標記的核酸,用於與目標序列雜交。了解各技術的原理有助於判斷哪些方法不依賴探針。
選項分析
(A) 等位基因特異性寡核苷酸(Allele-specific oligonucleotide, ASO) 需要探針,不符題意。 ASO 技術的原理是利用與特定等位基因序列互補的寡核苷酸探針進行雜交;需要兩條 ASO 探針(分別對應野生型與突變型等位基因),在嚴格條件下進行點狀雜交(dot blot hybridization)或微陣列雜交。因此,ASO 需要探針,不是正確答案。
(B) 原位螢光雜交(Fluorescence in situ hybridization, FISH) 需要探針,不符題意。 FISH 的核心是使用螢光標記的核酸探針,與染色體上的目標 DNA 序列原位雜交,在螢光顯微鏡下觀察訊號位置和數量。探針是 FISH 技術不可或缺的元件,故不符本題。
(C) 即時聚合酶連鎖反應(Real-time PCR)TaqMan 系統 需要探針,不符題意。 TaqMan 系統使用一條雙標記水解探針(dual-labeled hydrolysis probe),5' 端連接報告螢光染料
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