106年:(醫檢)生化(1)
下列何種染料最常用在 SDS-polyacrylamide gel 電泳後之蛋白質染色?
ACoomassie brilliant blue
BCongo red
CSudan Black B
Dethidium bromide
詳細解析
本題觀念:
本題考查 SDS-聚丙烯醯胺凝膠電泳(SDS-polyacrylamide gel electrophoresis, SDS-PAGE)後蛋白質染色的最常用染料。SDS-PAGE 是蛋白質分析的基礎技術,染色步驟用於可視化已分離的蛋白質條帶。
選項分析
(A) Coomassie brilliant blue ✅(正確答案) Coomassie brilliant blue 是 SDS-PAGE 後蛋白質染色的金標準(gold standard),也是實驗室最廣泛使用的蛋白質染料。常用型號為 R-250(解析度佳)和 G-250(靈敏度較高),偵測靈敏度約 0.1–0.5 μg 蛋白質/條帶。作用機制:帶負電的磺酸基與蛋白質上的正電基(主要是 Arg 和 Lys 殘基)以靜電作用結合,並透過疏水性作用與非極性胺基酸殘基結合,使蛋白質條帶呈現藍色。
(B) Congo red 主要用於組織切片中**澱粉樣蛋白(amyloid)**的檢測(偏振光下呈現蘋果綠雙折射),並非 SDS-PAGE 蛋白質染色用途,不正確。
(C) Sudan Black B 主要用於組織化學染色(histochemical staining)中**脂質(lipids)**的染色,包括磷脂、中性三酸甘油脂及膽固醇酯,或用於血液學中
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