106年:(醫檢)生化(1)
等電點聚焦( isoelectric focusing )電泳主要是用下列何種梯度方法分離物質?
A溫度
B密度
C鹽度
D酸鹼度
詳細解析
本題觀念:
等電點聚焦(isoelectric focusing, IEF)電泳的分離原理。IEF 是一種高解析度的電泳技術,主要用於依據蛋白質或兩性電解質(ampholyte)的等電點(isoelectric point, pI)進行分離,核心機制是在電泳槽中建立pH 梯度,蛋白質在電場作用下移動,直到到達與自身 pI 相等的 pH 位置時電荷歸零,停止移動,形成聚焦的條帶(focused band)。
選項分析
(A) 溫度 溫度梯度(temperature gradient)可用於某些特殊分離技術(如溫度梯度電泳),但不是 IEF 的分離原理。IEF 在均一溫度條件下進行,溫度控制目的是減少焦耳熱(Joule heating)造成的帶寬,而非利用溫度差異來分離。
(B) 密度 密度梯度(density gradient)是另一類分離技術的原理,如氯化銫(CsCl)密度梯度超高速離心(ultracentrifugation),不適用於 IEF 電泳。IEF 凝膠介質(如聚丙烯醯胺膠、固定化 pH 梯度膠條 IPG strip)並非依靠密度差異分離。
(C) 鹽度 鹽濃度梯度(salt gradient)主要用於離子交換層析(ion-exchange chromatography)的洗脫步驟,而非電泳技術的分離
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