106年:(醫檢)免疫病毒(1)
下列何種試驗會利用到 DNA 探針(probe )?
A南方墨點試驗( Southern blot )
B西方墨點試驗( Western blot )
C電子顯微鏡病毒顆粒計數
D酵素免疫分析( ELISA )
詳細解析
本題觀念:
本題考各種分子生物學與免疫學技術的原理,重點在於辨別哪一種技術會使用到 DNA 探針(DNA probe)。DNA 探針是一段已標記(放射性同位素、螢光素、地高辛等)的已知序列單股 DNA,利用核酸雜交(hybridization)原理,與互補的目標核酸序列結合,以偵測特定 DNA 或 RNA 序列。
選項分析
(A) 南方墨點試驗(Southern blot) ✅(正確答案) Southern blot 由 Edwin Southern 於 1975 年發明,是偵測特定 DNA 序列的經典方法。步驟:
- 限制酶(restriction enzyme)切割基因組 DNA
- 凝膠電泳(gel electrophoresis)依大小分離 DNA 片段
- 將 DNA 轉印(transfer)至尼龍膜(nylon membrane)或硝化纖維素膜(nitrocellulose membrane)
- 加入 DNA 探針進行雜交(hybridization):探針與互補序列結合
- 洗去未結合探針,利用放射自顯影(autoradiography)或化學發光(chemiluminescence)顯示結果
Southern blot 必須使用 DNA 探針,這是其核心步驟。
**(B) 西方墨點試驗(Western
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