下列的四個步驟為放射免疫分析實驗進行時的步驟，其順序為： ①計測（counting ） ②分離（separation ） ③加試劑（adding reagent ） ④培育（incubation ）

本題觀念：

本題考查放射免疫分析（radioimmunoassay, RIA）實驗操作的正確步驟順序。RIA 以競爭結合（competitive binding）為原理，需按照特定順序進行才能確保結果準確。

選項分析

四個步驟為：

• ① 計測（counting）
• ② 分離（separation）
• ③ 加試劑（adding reagent）
• ④ 培育（incubation）

(A) ①②③④ — 計測在最前面，完全不符合邏輯，先計測再加試劑是錯誤的。

(B) ③②④① — 加試劑 → 分離 → 培育 → 計測：在培育前就分離，破壞競爭結合平衡，錯誤。

(C) ③④②① ✅ — 加試劑 → 培育 → 分離 → 計測：正確順序，見答案解析。

(D) ③①②④ — 加試劑後直接計測，尚未達到結合平衡，錯誤。

答案解析

RIA 標準操作流程如下：

Step 1：加試劑（③ adding reagent） 將已知量的¹²⁵I 標記抗原（tracer）、待測樣本（含未標記抗原）與限量特異性抗體混合加入反應管。此步驟讓標記與未標記抗原開始競爭抗體結合位。

Step 2：培育（④ incubation） 在適當溫度（通常 4°C 或 37°C）下反應足夠時間（數小時至隔夜），使抗原–抗體結合

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