114年:醫學一(2)
下列何種分析方法一般不適用於分析蛋白質與蛋白質之間的交互作用?
A串接親和共純化( tandem affinity purification )
B免疫共沉澱法( co-immunoprecipitation )
C免疫組織化學染色法( immunohistochemical staining )
D酵母菌雙雜交測定( yeast two -hybrid assay )
詳細解析
本題觀念:
本題考查的核心觀念是蛋白質與蛋白質交互作用(Protein-Protein Interaction, PPI)的分析技術。
醫師國考的基礎醫學(醫學一)中,生物技術與分子生物學是常見考點。考生需區分哪些技術是用於檢測「物理性的結合/交互作用」,哪些是用於檢測「表現量」或「位點分布」。
選項分析
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A. 串接親和共純化(Tandem affinity purification, TAP):
- 分析:這是一種專門設計用來純化蛋白質複合體(Protein complex)的技術。它利用兩個不同的標籤(Tags)串聯在目標蛋白上,經過兩次連續的親和純化步驟,能極高純度地分離出目標蛋白及其結合夥伴(Interacting partners)。
- 結論:這是非常典型且強大的蛋白質交互作用分析方法,尤其適用於酵母菌等模式生物的複合體分析。
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B. 免疫共沉澱法(Co-immunoprecipitation, Co-IP):
- 分析:Co-IP 被視為研究蛋白質交互作用的黃金標準(Gold Standard)。其原理是利用抗體抓取目標蛋白(Bait),如果樣本中有另一個蛋白(Prey)與目標蛋白有物理性的結合,就會被一起沉澱下來。
...(解析預覽)...
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