110年:醫學一(1)

我們可以利用波長280 nm的吸光值來決定蛋白質樣品的濃度,此定量分析法的原理主要基於蛋白質中何種胺基酸的吸光特性?

A絲胺酸( serine)
B羥丁胺酸( threonine )
C色胺酸( tryptophan )
D纈胺酸( valine)

詳細解析

本題觀念:

紫外光吸收法測定蛋白質濃度 (UV Absorbance at 280 nm)

本題考查的是蛋白質定量分析的基礎原理,特別是利用紫外光分光光度計(Spectrophotometer)測量波長 280 nm 吸光值(A280A_{280})來推算蛋白質濃度的方法。此方法的原理建立在蛋白質中特定胺基酸側鏈的化學結構能夠吸收紫外光。

選項分析

  • (A) 絲胺酸(Serine)

    • 錯誤。絲胺酸屬於極性、不帶電荷的脂肪族胺基酸,其側鏈為羥甲基(-CH₂OH)。它不具備共軛雙鍵系統或芳香環結構,因此在 280 nm 波長下沒有顯著的吸光能力。
  • (B) 羥丁胺酸(Threonine)

    • 錯誤。羥丁胺酸同樣屬於極性、不帶電荷的脂肪族胺基酸,側鏈含有羥基。與絲胺酸一樣,它缺乏能夠吸收 280 nm 紫外光的芳香族結構。
  • (C) 色胺酸(Tryptophan)

    • 正確。色胺酸含有**芳香族吲哚環(Indole ring)**結構,具有共軛雙鍵系統。在 280 nm 處,色胺酸的莫耳吸光係數(Molar extinction coefficient)是所有胺基酸中最高的(約 5,500 M1cm15,500\ M^{-1}cm^{-1}),其次是酪胺酸(T

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