110年:營養生理生化(2)

欲估算某純化蛋白質的分子量大小,不可採用下列那種分析方式?

AWestern blot
BElectrospray ionization
CGel filtration chromatography
DMass spectrometry

詳細解析

本題觀念:

本題主要測驗考生對於蛋白質分子量測定方法的原理與應用之理解。常見測定或估算蛋白質分子量的方法包括膠體電泳(如 SDS-PAGE)、膠體過濾層析(Gel Filtration Chromatography)、以及質譜分析(Mass Spectrometry)。考生需區分「分析技術本身」與「技術中的特定元件或步驟」。

選項分析

  • A. Western blot(西方墨點法)

    • 可以估算。Western blot 的前置步驟通常是 SDS-PAGE(十二烷基硫酸鈉-聚丙烯醯胺凝膠電泳)。在 SDS-PAGE 中,蛋白質會根據其分子量大小進行分離(大分子跑得慢、小分子跑得快)。雖然 Western blot 的主要目的是透過抗體「鑑定」特定蛋白質的存在,但透過對照標準品(Protein Ladder/Marker)的移動距離,實驗者可以估算出顯色條帶(Band)的分子量大小,以確認是否為目標蛋白。
  • B. Electrospray ionization(電噴霧游離法,ESI)

    • 不可單獨使用。ESI 是一種游離技術(Ionization source),用於將溶液中的蛋白質分子轉化為氣相離子,以便進入質譜儀進行分析。它本身只是質譜儀的一個「組件」或「

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